CRISPR-Cas9基因編輯技術的出現為哺乳動物模型構建提供了簡便、快速的方法,也為基因疾病的治療提供新思路、新方法。 泓迅科技繼質粒DNA后全新推出CRISPR RNP介導的細胞基因編輯服務:平臺依托先進的技術和經驗豐富的科研團隊,為您打造從方案設計、sgRNA設計及化學合成、高活性重組Cas9蛋白,RNP復合物組裝到敲除細胞系構建的全流程服務。

服務流程

服務優勢:方案設計-合成-細胞系構建一體化服務

  1. 設計精準:專有設計算法,全模式物種CRISPR sgRNA設計
  2. 合成平臺:化學合成修飾化的sgRNA更穩定,純度>99%
  3. 重組Cas9蛋白:活性檢測,純度>99%
  4. 周期:周期短,最快至2周交付
  5. 定制化服務:根據客戶需求制定個性化方案,定期反饋項目進度,交付詳細的CoA文件。

服務詳情

服務項目 交付內容 交付周期
方案設計 專業的分析報告
設計序列
咨詢
合成與組裝 化學合成修飾化的sgRNA
高活性、高純度的Cas9蛋白
RNP復合物組裝
咨詢
敲除細胞系構建 多克隆細胞群或單克隆細胞株
提供細胞基因型復檢、擴增及凍存
咨詢
驗證 DNA水平檢測
蛋白水平檢測
咨詢

泓迅科技案例
1、利用RNP下的雙sgRNA編輯法,實現基因DNA水平片段敲除
案例:對X細胞的A基因進行Exon1-13的片段敲除(KO)
(1)在需求敲除片段兩端分別設計1條高靶向的sgRNA序列,如下圖:

(2)將gRNA-A1、gRNA-A2進行化學修飾合成后分別與Cas9蛋白組裝成RNP,轉染至X細胞進行A基因片段序列敲除;

(3)敲除結果檢測如下:
DNA水平-Sanger測序顯示,A基因序列已被敲除,結果如下:

細胞表型檢測如下圖:A為正常細胞,B為A基因敲除后的突變細胞形態,表明A基因被敲除。

2、RNP敲除效率遠超傳統質粒法
案例:以AAVS1位點敲除為例,比較質粒(DNA)與RNP的敲除效率
(1)將AAVS1-sgRNA1序列構建帶有Cas9的載體中,轉染細胞后提取基因組DNA,以基因組DNA為樣本進行Sanger測序并結合Synthego ICE分析軟件檢測,結果顯示敲除率為14%;

(2)將AAVS1-sgRNA1 RNP復合物轉染細胞后進行如(1)所述檢測,結果顯示敲除效率為69%;

(3)敲除效率比較(如下圖),結果顯示RNP敲除效率是質粒法的4-5倍,顯著高于質粒法。

服務訂購與咨詢
您可以通過以下任意方式下單或咨詢,工作時間我們保證在1小時內給您反饋:

  1. Email:請將您的需求發送到support@synbio-tech.com
  2. 電話訂購:工作日您可以撥打免費熱線4000-973-630(按1);休息日您可直接撥打18262686586聯系我們
  3. 在線咨詢:您有任何技術問題均可與我們進行網頁在線互動